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Construcción y validación de un plásmido para ensayos de fenotipado del HIV-1 usando luminiscencia
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Palabras clave

HIV-1
AIDS
Terapia antirretroviral

Cómo citar

Construcción y validación de un plásmido para ensayos de fenotipado del HIV-1 usando luminiscencia. (2021). Revista Eletrônica Acervo Saúde, 13(4), e7209. https://doi.org/10.25248/reas.e7209.2021

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Resumen

Objetivo: El objetivo de estos estudios fue la construcción de un vector de recombinación para la integrasa del HIV-1 que contenga el gen indicador de la luciferasa, con el objetivo de generar virus recombinantes que puedan utilizarse en ensayos de fenotipado con inhibidores de la integrase. Métodos: En este trabajo, el vector pNL4-3Luc fue manipulado molecularmente para eliminar el gen de la integrase y construir un vector para la recombinación de integrases de diferentes subtipos de virus. Resultados: Como resultado, se generaron virus con integrasas recombinantes en células HEK293T transfectadas con plásmidos, mostrando niveles significativos de luminiscencia. Después de la purificación de las partículas virales producidas, los linfocitos susceptibles se infectaron con los virus que contenían las integrasas recombinantes y se detectó luminiscencia en ambas integrasas del subtipo B y subtipo C del HIV-1. Conclusión: Observar la emisión de luz de las células infectadas por virus con diferentes integrase puede ser un método eficaz para evaluar la susceptibilidad de estos virus en presencia de inhibidores específicos de la integrase del HIV-1.

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